第九章 食品中真菌毒素检验

版本说明：课件目录中有两份——食品理化检验-霉菌毒素检验.ppt（SHA256 前 16 位 c97902a7132ba582）与食品理化检验-霉菌毒素检验（2）.ppt（ea46bfbe0d38505b）。两者字节不同，但正文内容一致；本轮以第一份为基准转存为 staging/v6/converted/真菌毒素课件.pptx（81 张），页码按该副本标注。第二份保留在文件名映射中，未重复处理。

与 v2 的差异：v2 的 lesson-15 因当时 .ppt 无法还原张号，全篇用“节名 + 段落特征”定位，并记录“玉米赤霉烯酮正文缺失”。本轮转换后逐张核对，该缺失不成立：第七节（第 79—81 张）讲的就是玉米赤霉烯酮，方法为乙腈-水提取 + 免疫亲和柱净化 + HPLC 荧光检测、外标法定量。v2 的结论作废，本页全部改按确切张号重写。

先建立整体认识

霉菌毒素不是“发霉了才有毒”这么简单。它是一类由丝状真菌在生长过程中分泌的次生代谢产物，特点是有机溶剂可溶、耐热、分子小，普通烹调去不掉。同一株霉菌可以产几种毒素，同一种毒素也可以由几种霉菌产生，所以检测对象从来不是“某种霉”，而是“某种化合物”。

本章的方法骨架只有两条线：

一是薄层色谱线——提取、净化、点板、展开、在紫外灯下看荧光斑点的颜色和位置，再与标准比。真菌毒素大多有天然荧光（黄曲霉毒素蓝紫色、赭曲霉毒素黄绿色），或者能在薄层板上通过加热、喷试剂“点亮”，所以薄层法在这个领域特别合适。它便宜、直观、能同时看多个点，缺点是定量靠目视比色，只能概略。

二是柱色谱线——微柱筛选法用一根小柱子把毒素截留住，看柱内吸附层的荧光环判断“有没有、大概多少”，是筛查；免疫亲和柱则利用抗体把毒素“抓”住，配上 HPLC 荧光检测做定量。

三条“掌握”目标正好覆盖这两条线：黄曲霉毒素 B1 走薄层（含确证与定量），微柱法走筛查，赭曲霉毒素 A 走薄层但要多一次双向展开。四条“熟悉”目标则是同一套思路在另外四种毒素上的应用。

核心内容

霉菌、霉菌毒素与产生条件

对应学习目标：了解（第 6—11 张）

霉菌是丝状真菌的俗称，能形成分枝繁茂的菌丝体，但不产生大型子实体（第 6 张）。课件列的强毒性霉菌毒素有黄曲霉毒素（AFT）、杂色曲霉素、赭曲霉毒素、伏马菌素、展青霉素、桔青霉素、玉米赤霉烯酮。

分类有四套并行标准（第 7—9 张），“了解”级只需知道有几套、各按什么分：按产毒霉菌命名；按毒作用部位分肝脏、肾脏、神经毒素与类性激素物质；按来源分曲霉、青霉、镰刀菌毒素；按机理分抑制蛋白质合成、作用于离子通道、细胞骨架、突触；按结构分二呋喃环、内酯环、醌类。三套用途不同：来源决定查哪类食品，靶器官决定中毒表现，结构决定检测手段——黄曲霉毒素含二呋喃环、紫外下有强荧光，薄层法才好用。

产生条件（第 10 张）四个：水分、pH、温度、湿度与氧气。三个具体数：粮食水分 17%—18% 最适繁殖产毒；相对湿度 80%—90% 多数霉菌生长良好；繁殖适温 25—30 ℃。这解释了为什么梅雨季的花生玉米风险远高于干燥地区，储粮要控水分而不只是控温度。

危害（第 11 张）：损害肝、肾、神经、生殖、消化系统，引起免疫抑制与细胞毒性，有致癌致畸致突变作用。课件给的具体数字是：黄曲霉毒素诱发肝癌，致癌所需最短 24 周——本章唯一的时间量化指标，说明它能在半年内完成诱癌。

黄曲霉毒素：性质决定了整个方法设计

对应学习目标：掌握（第 12—24 张）

黄曲霉毒素是黄曲霉、寄生霉和温特霉的代谢产物，毒性是氰化钾的 10 倍、砒霜的 68 倍，是最强化学致癌物之一；B1 最多见、毒性与致癌性最强；高温高湿地区的花生、玉米、大米、棉籽最易污染（第 13 张）。

四条理化性质各对应一个操作（第 15 张）：

• 耐热，280 ℃ 以上才裂解：煮沸油炸都破坏不了，所以“发霉花生煮熟也不能吃”。
• 耐光但不耐氧化剂：标准液避光保存；“不耐氧化剂”提示可用氧化手段破坏毒素。
• 难溶于水、乙醚、石油醚，易溶于甲醇和氯仿：这直接决定提取路线——甲醇-水把毒素拉出来，氯仿再把它转进有机相，石油醚/正己烷则用来先洗掉油脂。
• 碱性下内酯环破坏成香豆素钠盐，溶于水、无毒；酸性下逆向恢复毒性：这是“碱炼去毒”的化学基础，也提醒操作中不能随意改 pH。

第 16 张列五种方法：TLC、ELISA、微柱筛选法、HPLC、国标法。掌握目标里的前两条（TLC、微柱）都在其中。

薄层色谱法（单向展开）：从提取到定量

对应学习目标：掌握（第 17—24 张）

原理（第 17 张）：AFTB1 经甲醇-水提取、浓缩定容后点于硅胶 G 板，展开分离，在 365 nm 紫外下观察蓝紫色荧光，与标准比较荧光强度定量。三个要点：甲醇-水提取、硅胶 G 分离、365 nm 蓝紫荧光检测。

**样品处理（第 18 张）**五步：加正己烷（或石油醚）与甲醇-水振荡 → 分层取甲醇-水层 → 氯仿萃取 → 无水 Na₂SO₄ 脱水过滤 → 蒸干后用苯-乙腈溶解。

每一步都有理由：正己烷/石油醚共摇是液-液分配除脂，油进有机相、毒素留在水相；随后氯仿反萃，把毒素浓缩进小体积有机相；无水硫酸钠脱水避免水分带进薄层；最后蒸干、用苯-乙腈溶解便于点样。同一个“分配”原理用了两次、方向相反：一次把毒素留在水相去脂，一次把它转进有机相浓缩。

**点样（第 19 张）**是技术核心：距板下端 2 cm 基线，一点 4 个点，直径约 3 mm、大小一致、在一条直线上。

点位	加样	作用
1	淡标（0.04 μg/mL）10 μL	最低荧光点（0.0004 μg），标尺
2	样液 20 μL	样点
3	样液 20 μL + 淡标 10 μL	加标对照
4	样液 20 μL + 浓标（0.2 μg/mL）10 μL	荧光定位

第三、四点是薄层法的精髓：加标后荧光若正好是两者之和，说明样品里确有同一化合物；若出现两个分开的斑点，说明样品中的荧光物质与标准不是同一种。这比“样点与标点并排比”可靠。

图注：第 19 张点样布局。第一点只加淡标作最低荧光点；第三、四点分别加淡标与浓标，用于加标对照与荧光定位。

预展与展开（第 20 张）：预展 12 cm、展开 10—12 cm。预展把板上杂质先推到上端，避免干扰目标区分离，复杂基体时不能省。

观察与确证（第 21—22 张）：Rf≈0.6 处有蓝紫色荧光即疑似阳性。确证是在点样处滴三氟乙酸，反应 5 min、热风吹 2 min（低于 40 ℃），再展开观察——AFTB1 转为 AFTB2a，极性增大，荧光点从 Rf≈0.6 移到 0.1 附近。确证靠的是衍生产物在板上的行为改变，不是颜色。确证点样四点：淡标+三氟乙酸、样液+三氟乙酸、淡标不加、样液不加，前两点衍生后两点对照，一比就知道位移是否由三氟乙酸造成。

定量（第 23—24 张）：定量点样四点——淡标 10 μL（0.0004 μg），样液分别为 10、15、20 μL。样点荧光与淡标点一致时，含量即 0.0004 μg；样点更亮则减少滴加量或稀释重做，直到与最低检出量一致。这就是“概略定量”：不查曲线，而是调整样品量到“看起来一样”，用“用了多少样品才与最低点相同”反推含量。精度不高却能当标准方法，原因就在这里——基准落在目视可辨的最低量上。

高效液相色谱法：同一毒素的仪器路线

对应学习目标：掌握（第 25—28 张）

原理（第 25 张）：经 C18 柱分离，荧光检测器检测，保留时间定性、峰面积或峰高定量。

提取（第 26 张）：粉碎→加少量水→氯仿提取→无水 Na₂SO₄ 脱水→过滤。这里没有先用甲醇-水，而是水润湿后直接氯仿提取——HPLC 对净化要求更高，后面靠柱色谱，前一步越简单越好。

净化与衍生（第 27 张）：硅镁型吸附剂装柱，氯仿-正己烷、氯仿-甲醇洗脱杂质，丙酮-水洗脱目标物；蒸干后氯仿溶解，取部分加正己烷与三氟乙酸，静置 30 min，氮气吹干，流动相溶解后进样。衍生与薄层法的三氟乙酸确证是同一个反应——都生成荧光更强的 B2a，薄层用它证明身份，HPLC 用它提高信号。

条件（第 28 张）：荧光检测器激发 360 nm、发射 425 nm；C18 柱；流动相甲醇-0.01 mol/L 磷酸二氢钾（1+1）或乙腈-甲醇-水（50+150+300）；流速 1.3 mL/min。

三组数字要分清：薄层法看 365 nm 紫外灯下的目视荧光，HPLC 用 360 nm 激发、425 nm 发射的仪器荧光，数值接近但不是一回事。

微柱筛选法：一根柱子定“有没有”

对应学习目标：掌握（第 29—37 张）

原理（第 29 张）：样液中毒素被微柱内硅镁型吸附剂吸附后，在 365 nm 紫外灯下显蓝紫色荧光环，强度与含量在一定范围内成正比。微柱上不能分离 B1、B2、G1、G2，所以测的是总黄曲霉毒素。标准依据 GB/T 5009.23—2006。

这句话是理解微柱法的钥匙：它是总量筛查，不是 B1 专属方法。目标里写“微柱筛选法测定 AFTB1”，指的是用途（判断 B1 是否超标），方法本身测总量，答题要写清。

装置（第 30 张）：玻璃微柱内径 0.4 cm、长 12 cm，上部可接粗管口；层析架附废液容器，尽量密闭。

柱管制备（第 33 张），从下往上：

层次	材料	厚度
底层	脱脂棉	—
1	无水硫酸钠	0.5 cm
2	硅镁型吸附剂	0.5 cm
3	无水硫酸钠	0.5 cm
4	中性氧化铝	1～2.5 cm
5	酸性氧化铝	1.5 cm
6	无水硫酸钠（60～100 目）	3 cm
顶层	脱脂棉	—

图注：第 33 张微柱管制备，箭头向下为流动方向。红字标出的硅镁型吸附剂是捕获毒素并产生荧光环的关键层，上下各有一层无水硫酸钠保护它不被水浸润。

赭曲霉毒素 A：双向薄层

对应学习目标：掌握（第 38—49 张）

性质（第 39 张）：由赭曲霉、硫色曲霉、蜂蜜曲霉及绿青霉产生；OTA 毒性最大，霉变谷物与饲料中最常见；微溶于水、石油醚，加碱成盐后水溶性增大；酸性时溶于苯、氯仿；对紫外线不稳定，几天即分解，须避光。

“加碱成盐”与黄曲霉毒素的“碱性开环”不同：OTA 只是成盐，结构未破坏，酸化后仍回有机相——所以净化流程里反复出现“碳酸氢钠提取—盐酸酸化—氯仿反萃”。“对紫外不稳定”也与黄曲霉毒素（耐光）相反，标准液必须避光、薄层板不能在紫外灯下久照。

方法（第 40 张）：三氯甲烷-0.1 mol/L 磷酸或石油醚-甲醇/水提取，液-液分配后按 365 nm 下黄绿色荧光与标准比较，采用双相展开法；标准 GB/T 5009.96—2003。

提取两条路（第 41—42 张）：甲法加氯仿与磷酸，氯仿层用 NaHCO₃ 提取（成盐进水相），水层酸化后氯仿反萃、蒸干、苯-乙腈溶解；乙法用甲醇-水提取，石油醚去脂，氯仿萃取，NaCl 饱和液洗后蒸干。共同点是“粗提—分配—转进小体积有机相”，差别在甲法多一次“碱提—酸反萃”，专门利用成盐性质。

**双向展开（第 43—45 张）**三步：纵展 2～3 cm（无水乙醚或乙醚-甲醇-水），让杂质刚离原点就分层；横展 10～12 cm（同展开剂），换垂直方向把没分开的杂质甩到另一方向；纵展 13～15 cm（甲苯-乙酸乙酯-甲酸-水等），真正分离。三次展开、两种方向、三类展开剂，本质是“用两次不同选择性的展开把杂质推到板的另外两个角”，所以 OTA 的薄层图比黄曲霉毒素“干净”。

观察与确证（第 46 张）：与标准点相应处有黄绿色荧光即疑似阳性；确证喷碳酸氢钠乙醇溶液、干燥后观察，荧光点由黄绿色变蓝色。这是“变色”确证，与黄曲霉毒素的“位移”确证不同。

稀释定量（第 47—48 张）：比较样液与标准点荧光强度估计稀释倍数。含量高时荧光点会被拉长、变扁或分成两点（横展时原点载量超过硅胶吸附能力）；稀释后可在样液点左侧基线滴 4 ng、8 ng 标准点，比较后概略定量。

方法说明（第 49 张）：适用于小麦、玉米、大豆；板上最低检出量 4 ng；方法最低检测量 10 μg/kg；标准液冰箱黑纸避光保存。“最低检出量 4 ng”是板上绝对量，“最低检测量 10 μg/kg”是样品含量，两个单位混用是本章最常见错误。

四种“熟悉”级毒素：方法对照

对应学习目标：熟悉（第 50—81 张）

按目标只写用途、方法与边界，不展开成操作教程。

展青霉素（第 50—60 张）：无色结晶，熔点 110 ℃，70—100 ℃ 可升华；溶于水和乙醇；碱性不稳定，酸性下较稳定且耐热（第 51 张）。主要存在于腐烂水果及制品，由荨麻青霉、扩张青霉、棒曲霉产生。方法有 GC、HPLC、TLC，我国标准方法是双向薄层扫描定量法（第 52 张），乙酸乙酯提取、1.5% 碳酸钠净化、双向薄层分离后紫外反射扫描，适用于苹果、山楂制品，标准 GB/T 5009.185—2003。薄层条件（第 57—58 张）：硅胶 GF254，先横展再纵展，254 nm 下 Rf≈0.35 处若出现黑点即阳性——因为 GF254 是荧光板，展青霉素吸收紫外光显暗斑，与黄曲霉毒素、OTA 的亮斑相反。确证喷 MBTH，130 ℃ 烘 15 min，360 nm 下应呈橙黄色。定量波长 270 nm、参考 310 nm（第 60 张）。课件只给符号表没有完整计算式，本页只保留符号含义，不复写公式。

DON 与 NIV（第 61—72 张）：DON 化学名为三羟基-12,13 环氧单端孢霉-9 烯-8 酮，可溶于水、含水甲醇乙醇、乙酸乙酯，紫外下无荧光；NIV 为四羟基同系物，极性更大，也称呕吐毒素（第 62 张）。主要来自雪腐镰刀菌污染的小麦、玉米、豆饼（第 63 张）。“无荧光”解释了为什么要特殊处理：制板时加三氯化铝、展开后 130 ℃ 加热，DON 才在 365 nm 下显蓝色荧光——说明“薄层能测”不等于“目标物本身有荧光”。方法：我国标准为 TLC（第一法）与免疫测定法（第二法），另有 GC、HPLC、微柱法，标准 GB/T 5009.111—2003。流程（第 65—69 张）：加水与三氯甲烷-无水乙醇振荡 1 h，过滤蒸干，石油醚溶解残渣，甲醇-水分次洗、过中性氧化铝与活性炭柱，浓缩后用乙酸乙酯溶解；先横展（乙醚-丙酮）再纵展（三氯甲烷-丙酮-异丙醇 8:1:1）。观察：365 nm 下杂质有荧光、DON 无荧光；130 ℃ 加热后冷却再看，DON 处无荧光为阴性。NIV 原理相同，提取用甲醇-水、XAD-4 柱净化（第 70—71 张），展开剂配比课件未给。

T-2 毒素（第 73—78 张）：多种镰刀菌产生，污染小麦、大麦、玉米；难溶于水，易溶于三氯甲烷、丙酮、乙酸乙酯；标准 GB/T 5009.118—2008，方法有 HPLC、间接与直接 ELISA（第 74 张）。HPLC 原理（第 75 张）：甲醇-水提取，免疫亲和柱净化，浓缩衍生定容，荧光检测器测定，外标法定量。免疫亲和柱（第 76 张）靠抗原抗体反应：抗体接在柱内，净化液缓慢通过时毒素与抗体结合，洗涤除去无关物质，甲醇洗脱——“抗体抓毒素”比吸附剂“截留”选择性高得多。流程（第 77 张）：甲醇-水均质→离心→过滤→稀释→玻璃纤维滤纸→上柱→水淋洗→1.5 mL 甲醇洗脱→氮吹。衍生（第 78 张）：加二甲基氨基吡啶与氰酸蒽，50 ℃ 反应，氮吹后用乙腈-水溶解进样。T-2 本身荧光弱，必须衍生才能用荧光检测器。

玉米赤霉烯酮（第 79—81 张）：v2 曾判“缺失”，本轮确认存在。方法（第 80—81 张）：乙腈-水提取，免疫亲和柱净化、浓缩，荧光检测器 HPLC 测定，外标法定量。与 T-2 相比路线更短——不需要衍生，因其分子本身有荧光（内酯共轭体系）。这是“熟悉”级最该记住的对照：同一套免疫亲和柱 + HPLC-FLD，T-2 多一步衍生，玉米赤霉烯酮不用。

一条被忽略的线索：导入案例的定性

课件第 2 张用 2020 年黑龙江鸡西“酸汤子”事件导入：9 人发病、8 人死亡，初步定性为椰毒假单胞菌产生的米酵菌酸。

这里要标疑：米酵菌酸是细菌产生的毒素，不属于霉菌毒素；把它当作本章导入，在分类上并不严格，课件本身也只说“属于食物中毒事件”。本页保留课件原意作引子，但正文不把米酵菌酸当霉菌毒素处理，题库也不出“米酵菌酸属于真菌毒素”这类题。

图表与结果怎么看

点样布局（第 19 张，已 1600×900 渲染核对）。 四个点在一条基线上等距排列，读法是“先看第一点（最低荧光点）有多亮，再看第二点（样点）比它亮多少，最后看第三、四点有没有出现两个斑”。第一点的荧光强度是整块板的标尺，若第一点都看不清，说明点样量不足或板失效，后面所有比较都作废。

微柱管分层（第 33 张，已渲染核对）。 图上箭头向下，表示液体从上往下走。读这张图不要从下往上背，而要先找到红字标出的硅镁型吸附剂层——它在柱子的下半部，上下各有一层 0.5 cm 无水硫酸钠，再往下才是底层脱脂棉。判断“荧光环位置对不对”时看的就是这一层。

双向展开的读板顺序（第 43—46 张）。 三次展开后板上会出现一个“十字”形的分离轨迹：纵向短展留下的杂质在下方，横向展把杂质推向侧面，最后纵展把目标点送到 Rf 合适的位置。观察时先找标准点的黄绿色荧光，再在样液对应位置找同色斑点；若斑点被拉长或分裂，说明上样量过大，需要稀释后重做。

易混点

微柱法测“总量”与 TLC 测“B1”。 微柱不能分离 B1、B2、G1、G2，报的是总黄曲霉毒素；TLC 通过 Rf 区分，能报 B1。目标里说“微柱筛选法测定 AFTB1”，指的是用途而非被测物。

微黄色环与蓝紫色环。 微黄 = 未检出；蓝紫 = 需确证。颜色代表“有无”，不是“多少”。

三种“点亮”手段。 黄曲霉毒素靠自身荧光（365 nm 蓝紫）；OTA 靠自身荧光（365 nm 黄绿）+ 碳酸氢钠乙醇喷洒变色确证；DON 靠三氯化铝制板 + 130 ℃ 加热才显蓝色荧光；展青霉素靠 254 nm 下的暗斑 + MBTH 显色确证。四种机制各不相同，不能互相套用。

单向展开与双向展开。 黄曲霉毒素 B1 用单向；OTA 与展青霉素、DON 都用了双向（先横后纵或先纵后横）。双向的目的是“把杂质甩到另一个方向”，代价是操作时间成倍增加。

“最低检出量”与“最低检测量”。 OTA 的 4 ng 是板上绝对量，10 μg/kg 是样品含量；黄曲霉毒素的 0.0004 μg 是板上绝对量。单位不同，不能直接比较。

三氟乙酸衍生与三氯化铝制板。 前者用于黄曲霉毒素（B1→B2a，极性增大、位移），后者用于 DON（与毒素形成荧光配合物）。一个改分子，一个改环境。

衍生与不衍生。 T-2 毒素要衍生（本身荧光弱）；玉米赤霉烯酮不用衍生（本身有荧光）。这是两种“熟悉”级毒素最实用的区别。

常见考试问法

本课件没有思考题页（第 81 张为最后一页正文，全篇无习题）。以下问题按三条掌握目标与四条熟悉目标整理，不是课件原题。

1. 黄曲霉毒素 B1 的理化性质有哪几条？每一条分别决定了什么操作？
2. 薄层色谱法测定 AFTB1 时，四个点样点各加什么、各起什么作用？
3. 三氟乙酸确证的原理是什么？为什么确证后荧光点会从 Rf 0.6 移到 Rf 0.1？
4. 微柱筛选法的柱管从下往上由哪几层组成？哪一层是“检测层”？
5. 微柱法结果观察中，微黄色荧光环与蓝紫色荧光环分别说明什么？
6. 赭曲霉毒素 A 的薄层法为什么要双向展开？三次展开各用什么展开剂？
7. 赭曲霉毒素 A 的确证反应是什么？与黄曲霉毒素的确证有什么不同？
8. 展青霉素在薄层板上为什么显“黑点”而不是荧光点？
9. DON 本身无荧光，薄层法如何让它显色？
10. T-2 毒素与玉米赤霉烯酮都用免疫亲和柱 + HPLC 荧光检测，两者的差别在哪一步？

往年考点（公众号回忆）

公众号回忆只作重点线索，答案与口径以课件为准。

高频核心

• 面制品被椰毒假单胞菌污染：产米酵菌酸，发酵米面制品风险最高。
• 霉菌的毒素与危害（简答题）：肝、肾、神经、生殖多系统损害，且有致癌性。

一般考点

• 哪些菌产毒较强

必须能回答的问题

• 黄曲霉毒素“耐热”到什么温度？这个数字对日常饮食意味着什么？
• 碱性条件对黄曲霉毒素和赭曲霉毒素 A 各有什么影响，为什么处理方式不同？
• 薄层法的定量为什么靠“调整点样量”而不是“读荧光强度”？
• 微柱法为什么只能报总量？
• 免疫亲和柱比普通吸附柱好在哪？
• 四种“熟悉”级毒素里，哪一种不需要衍生就有荧光？哪一种必须衍生？
• 展青霉素为什么主要出现在水果制品里？

来源

课件

• 《食品理化检验-霉菌毒素检验.ppt》，81 张（副本 staging/v6/converted/真菌毒素课件.pptx）。本页引用第 2—81 张，逐处已标张号。
• 重复文件：《食品理化检验-霉菌毒素检验（2）.ppt》，字节不同但正文一致，未单独处理。
• 已渲染核对：第 19 张（点样布局）、第 33 张（微柱管分层）。图片存于 resources/courseware/lesson-15/。

官方标准

• 课件引用但本轮未取得原文：GB/T 5009.23—2006（微柱筛选法）、GB/T 5009.96—2003（OTA）、GB/T 5009.185—2003（展青霉素）、GB/T 5009.111—2003（DON）、GB/T 5009.118—2008（T-2）。本页只按课件原样记录标准号与课件给出的条款要点，未补写任何课件之外的限量或检出限。

教材

• 未获得。课件第 29 张标题带“P130”，疑为教材页码，未核实对应教材。

外部资料

• 未使用。

理解性补充

• “正己烷/石油醚先除脂、氯仿再反萃，同一分配原理用了两次”的解释：课件只给流程，未说明理由。
• 微柱七层“各有分工”的归纳（两层脱脂棉堵头、三处无水硫酸钠防失活、两层氧化铝净化、硅镁层检测）：课件只列层次与厚度。
• “同一个免疫亲和柱 + HPLC 平台，T-2 要衍生、玉米赤霉烯酮不用”的对照：由第 75—81 张归纳。
• 展青霉素“黑点”与 GF254 荧光板的关系：课件只写“若样品点出现黑点则阳性”，未解释原因。

外部网页

以下条目均为公众号发布的考试回忆，不是官方原卷。按要求不列公众号名称、文章标题、发布日期与链接，只保留内部编号与条目定位。

• 公众号考试回忆（wx-02）：简答第 2 题、多选第 5 条。
• 公众号考试回忆（wx-03）：单选第 4 条、简答第 4 题。
• 公众号考试回忆（wx-05）：第 3 条、简答第 5 题。
• 上述 wx-01 与 wx-03 为同一场考试的两个投稿版本，考点逐条相同，合并计一次，不重复计权重。

待核实问题

1. 导入案例的定性。 第 2 张以米酵菌酸（椰毒假单胞菌产生）作真菌毒素章节的引子，分类上不严格；课件自身也只写“属于食物中毒事件”。本页保留为引子，未把它当霉菌毒素讲。
2. 第 14 张为空白页。 文字层与图形区均无内容，疑为排版遗留；未影响前后文。
3. 展青霉素的毒性与卫生标准缺失。 第 52 张列出“三、毒性与危害”“四、卫生标准”“五、分析方法”三个标题，但前两项标题下没有任何内容，只有分析方法有正文。本页因此不写展青霉素的毒性与限量，属课件缺口，非本页遗漏。
4. 展青霉素计算式只有符号表。 第 60 张给出 X、Y、c、A、S、V、D、m、V₁ 九个符号的含义，但没有给出完整式子；本页不复写公式。
5. 第 60 张“扫描速度 40nn/min、记录仪纸速 20nn/min” 明显为排版错误，单位应为 mm/min。本页按 mm/min 书写并在此说明。
6. 第 78 张“氰酸蒽” 疑为 T-2 毒素衍生试剂名称的笔误（常用为 1-蒽氰 / 1-cyanoanthracene 类荧光衍生剂），未查到确切对应，本页照录原词并标疑。
7. 微柱法“未检出（在 5 或 10 μg/kg 以下）“并列两个数，课件未说明何时用 5、何时用 10，本页照录，未合并。
8. 第 29 张标题“微柱筛选法P130” 中的 P130 疑为教材页码，未核实教材版本。
9. 玉米赤霉烯酮一节只有方法与原理两页（第 80、81 张），没有限量、没有色谱条件；本页按“熟悉”级只写方法与路线差异，未补写条件。
10. v2 结论作废说明：v2 记录“玉米赤霉烯酮正文缺失”，本轮确认第七节存在（第 79—81 张），该结论不再成立。